可以從這幾個方面一一考慮：

　　1.設計的抗原與被免疫的動物內源蛋白有極高的同源性或者抗原是免疫原性極差的小分子物質。對于前一種情況應該重新設計抗原，設計抗原時盡量選取目標蛋白特異性的序列，可以設計短肽然后與載體蛋白偶聯之后免疫;對于后一種情況，首先確認小分子物質是否已經正確和載體蛋白偶聯，如果偶聯沒有問題，可以更換其它的載體蛋白，一般來說KLH 是所有載體中優(yōu)先考慮的蛋白

　　2.免疫的周期不正確。免疫周期過長或過短，各免疫步驟之間的間隔過長或過短都有可能影響免疫效果。

　　3.免疫佐劑不合適。TiterMax 等佐劑在免疫時，對于某些抗原可能效果不佳，弗低佐劑也不能保證完全有效，此時可以考慮更換佐劑嘗試。

　　4.免疫劑量不合理。過大的免疫劑量可能導致免疫耐受，過少的免疫劑量可能無法激活免疫應答。

　　5.免疫途徑不合理。對于有些免疫原性弱的抗原，可以考慮脾內免疫方法。

　　6.測效價的過程存在錯誤操作，尤其考慮包被是否成功或二抗使用是否正確。同時，一抗(即血清)稀釋梯度盡量放寬，一般建議從1：200或1：1000開始作梯度稀釋。對于小分子物質，效價達到1：2000仍可視為免疫功。