為何有些抗體做WB檢測(cè)到的條帶與理論大小相比有區(qū)別?

　　導(dǎo)致這一結(jié)果的主要原因有：

　　1.天然蛋白存在某些修飾情況，如磷酸化、糖基化等，這些修飾都會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)的分子量增加。

　　2.有些蛋白存在不同的isform，每個(gè)isform得到的蛋白大小都有所差別。

　　3.氨基酸組成，不同氨基酸所帶電荷不一樣，導(dǎo)致相對(duì)電荷不同，遷移率有所差異，通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)的大小會(huì)有所偏差。

　　4.多聚體(二聚、三聚等)，多聚體形式的蛋白常常會(huì)抵制WB所做的還原條件，還原不完全等會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)條帶偏大。

　　5.翻譯后的剪切，有些蛋白以前體的形式合成或者帶有信號(hào)肽，翻譯后剪切掉前肽或者信號(hào)肽，導(dǎo)致檢測(cè)條帶變小。